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我国对噬菌蛭弧菌的研究(二)

日期:2015-05-05 17:32 | 查看:1952/次 | 评论:0/条 | 编辑:杨君武 | 来自:《当代水产》杂志

导读:

腾氏水产商务网报道:

1.4 蛭弧菌的形态结构

蛭弧菌噬菌斑革兰染色高倍镜观察,可见典型的、多量的革兰阳性、小的弧或杆状细胞。蛭弧菌噬菌斑悬滴相差显微镜下可见到运动极其活泼,呈跳跃式积极追捕宿主的蛭弧菌细胞,在相差显微镜下可以连续观察蛭弧菌吸附、侵染,进入、增殖、生长、裂解宿主细胞的全过程。

电子显微镜负染透射镜观察,可见到弧状或杆状蛭弧菌细胞,细胞一端有一长的单鞭毛(图1)。还可见到蛭弧菌吸附在宿主菌细胞上的典型形态(图2)。



我们观察了12株蛭弧菌的形态,结果发现不同蛭弧菌的细胞大小有所差别,同株的细胞大小也有差异。蛭弧菌细胞的大小,一般为长0.8~1.4μm,宽0.3~0.5μm之间。超薄切片电镜观察,可见到蛭弧菌在细胞内生长、繁殖的结构(图3)。


1.5 pH对蛭弧菌噬菌斑形成的影响

我们观察了于不同pH自来水宿主双层琼脂平板上检查蛭弧菌(Bd81,Bd98)形成噬菌斑的能力,结果表明pH对蛭弧菌生长及噬菌斑形成有明显的影响,虽然pH在3.0~9.8的自来水宿主菌双层琼脂平板上均可形成噬菌斑,而pH7.0~7.6最为适宜。pH在5.5或以下,pH值为9.0或以上,噬菌斑数目约减少一半.但蛭弧菌的生物特性不发生改变。


呼兰等从人粪便分离获得的蛭弧菌BdC、BdE、BdL、BdW最适pH为7.0,pH9.0不能形成噬菌斑,其原因有待进一步检查。


1.6 温度对蛭弧菌的影响

1.6.1 温度对蛭弧菌噬菌斑形成的影响

不同蛭弧菌株形成噬菌斑的最适宜温度并不完全相同。我们观察了来自海水、海泥、河水、河泥、湖水、污水和人粪便中分离得到的262株蛭弧菌在4,10,15,20,25,30,37℃环境中形成噬菌斑的能力,发现20~30℃时对大多数菌株的噬菌斑形成更为适宜。少数菌株(Bd59)37℃更为适宜。人粪便中分离的蛭弧菌也是以37℃最为适宜。在4℃冰箱中也能形成噬菌斑,但需较长时间(如12d以上)。近来研究发现,极少数菌株可诱导至43℃中生长。为利用蛭弧菌制剂预防动物肠道细菌病提供了依据。


1.6.2 温度对蛭弧菌生长增殖的影响

秦生巨等报道,在灭菌自来水中加入适当比例的蛭弧菌和宿主福氏志贺菌,分别于4℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃和37℃及室温(7℃±2℃)水浴中培养,每隔24h取样一次,以自来水宿主双层琼脂平板法检查蛭弧菌生长繁殖的数目。从自来水宿主双层琼脂平板中蛭弧菌形成噬菌斑数目来看,蛭弧菌生长繁殖的最为适宜温度为25℃,温度较高,如37℃时蛭弧菌数目反而逐渐减少,并失去活力。但于4℃冰箱中可继续生存,培养至第4天增殖数量为最高,此后反而减少,原因有待进一步研究,或可能因为宿主减少,蛭弧菌没有赖以繁殖的宿主。


1.6.3 温度对蛭弧菌活力的影响

研究中发现蛭弧菌培养物不耐热,如蛭弧菌Bd81、Bd98,15~25℃以上时乃呈渐渐失活的现象,如以25℃时,蛭弧菌的活存数目为100%,则15~20℃时呈较为稳定状态,存活数分别为94.9%~100%(Bd81);30,35,40,45及50℃是时存活率依次为78.0%,62.7%,40.7%,30.5%和0%。


1.6.4 温度对蛭弧菌净化河水的影响

蛭弧菌在污水自净过程中参与作用的研究结果证明,蛭弧菌裂解作用可降低污水中异养性革兰阴性杆菌及大肠杆菌的数量。这种裂解活性明显地受温度影响,因为温度可影响寄生菌与宿主菌之间相互作用的速度,在水温为26℃时寄生物/宿主(P/H)的指数最大,而在19℃时最小。当污水在26℃净化时,沉淀池污水中含大肠杆菌为800CFU/ml,而在19℃净化水时含大肠杆菌为4000 CFU/ml,污水中相互作用的微生物数量发生变化,这是典型的P/H的关系。这些研究结果证明,在污水自净过程中,蛭弧菌在26℃环境河水中可以有效地参与清除肠道微生物群,而在23.5℃时清除率低,在19℃环境河水中蛭弧菌不能实现对其污水净化作用。另据报道,蛭弧菌Bd81和Bd98在25℃的湖水中对宿主福氏志贺菌有显著的清除作用,如7d时,福氏志贺菌可被清除92.8%(Bd81)和94.4%(Bd98)。不加蛭弧菌的对照仅减少20%,统计学有非常显著性差异(P<0.01)。


《当代水产》杂志鸣谢中国医学细菌中心弧菌噬菌体研究室秦生巨老师长期提供的文章。

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